Nikolaus Rost, auch Rosthius, (* um 1542 in Weimar; † 22. November 1622 in Kosma [Altenburg/Thüringen]) war ein deutscher Kantor und Komponist der Renaissance. Rost studierte zwar Theologie, widmete sich aber zunächst seinen musikalischen Interessen. Nach Tätigkeiten in den Hofkapellen in Weimar und Heidelberg (1579 ist er auch als Kantor in Linz nachgewiesen) berief ihn der Herzog von Altenburg als Kapellmeister, was aus den Drucken aus den Jahren 1583 bis 1594 hervorgeht. 1614 versah er schließlich doch noch den Pfarrdienst im Altenburger Ortsteil Kosma.
Von seinen zahlreichen Kompositionen sind nur vier Sammlungen erhalten; ein Buch „Fröliche neue teutsche Gesänge zu 4–6 Stimmen“, theils zu weltlichen, theils zu geistlichen Texten (1583)“; ein zweiteiliges Werk „Neuer lieblicher Galliardt, mit schönen lustigen Texten so bei allerhand ehrlichen Gesellschaften, Gastereien und anderem Wolleben zur Freude ganz bequem mit 4 Stimmen komponirt“ (1593 und 94), ferner eine Sammlung Motetten mit lateinischen Texten zu 6–8 Stimmen, die er als Pastor 1613 in Gera herausgab.